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IPS培養(yǎng)基的基本構(gòu)成及其作用

更新時間:2025-08-07

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  IPS培養(yǎng)基是指誘導(dǎo)多能干細胞培養(yǎng)所需的特殊培養(yǎng)基。iPSCs是一類通過重編程成人體細胞(如皮膚細胞或血液細胞)所得到的具有多潛能的干細胞,具有和胚胎干細胞相似的特性,能夠分化成多種不同類型的細胞。這種技術(shù)在再生醫(yī)學(xué)、疾病研究、藥物篩選和個性化治療等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用潛力。
 

 

  ips培養(yǎng)基的基本組成:
  1.基礎(chǔ)培養(yǎng)液:基礎(chǔ)培養(yǎng)液通常是DMEM/F12(Dulbecco'sModifiedEagleMedium/F12),這是一種常用于細胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液。它提供細胞生長所需的基本營養(yǎng)成分,如氨基酸、維生素、礦物質(zhì)等。
  2.血清或替代物:大部分iPSCs培養(yǎng)體系使用的培養(yǎng)基包含胎牛血清(FBS),血清為細胞提供生長因子、營養(yǎng)成分及附著因子。隨著技術(shù)的進步,許多研究者嘗試使用無血清培養(yǎng)基,這樣可以減少潛在的免疫反應(yīng)和病毒污染的風(fēng)險。市面上也有無血清的iPSCs培養(yǎng)基,通常使用成分較為精確的合成替代物,如KnockOutSerumReplacement(KSR)等。
  3.生長因子和小分子:為了維持iPSCs的多能性和自我更新能力,通常需要添加生長因子。最常見的生長因子包括堿性成纖維生長因子(bFGF),該因子能夠促進干細胞的增殖并防止其分化。小分子如CHIR99021、SB431542等也常常被加入培養(yǎng)基中,以進一步促進細胞的重編程和維持其多能性。
  4.抗生素:為了防止細胞培養(yǎng)過程中發(fā)生細菌污染,通常會添加抗生素,如青霉素和鏈霉素。盡管抗生素能夠抑制細菌生長,但長期使用可能會對細胞本身造成不利影響,因此應(yīng)根據(jù)需要謹慎使用。
  ips培養(yǎng)基的優(yōu)化:
  1.低氧培養(yǎng):研究表明,在低氧環(huán)境下培養(yǎng)iPSCs能夠更好地維持其多能性。低氧可以促進細胞自我更新和減緩分化。通常,iPSCs培養(yǎng)在21%氧氣濃度的常規(guī)培養(yǎng)條件下進行,但有研究表明在5%的氧氣濃度下培養(yǎng)iPSCs能夠提高其生長速度和穩(wěn)定性。
  2.細胞密度控制:細胞的密度對iPSCs的質(zhì)量和生長速度有顯著影響。較高的細胞密度有助于維持細胞的多能性,而低密度則可能導(dǎo)致早期分化。因此,保持適當?shù)募毎芏葘τ诔晒ε囵B(yǎng)iPSCs至關(guān)重要。
  3.小分子調(diào)控:除了bFGF和其他生長因子,許多小分子也被發(fā)現(xiàn)能夠調(diào)節(jié)iPSCs的狀態(tài)。例如,抑制某些信號通路(如TGF-β和Wnt通路)可以提高iPSCs的穩(wěn)定性和質(zhì)量。通過精細調(diào)整這些小分子的濃度,可以在不同階段控制iPSCs的增殖、分化或自我更新能力。

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